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PCR產(chǎn)物量過少處理辦法

日期:2025-04-26 07:29
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摘要: PCR產(chǎn)物量過少處理辦法: 1、退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。 2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。 3、PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。 4、引物量不足。增加體系中引物含量。 5、延伸時(shí)間太短。以1 kb/min的原則設(shè)置延伸時(shí)間。 6、變性時(shí)間過長。變性時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。

PCR產(chǎn)物量過少處理辦法:

1、退火溫度不合適。以2度為梯度設(shè)計(jì)梯度PCR反應(yīng)優(yōu)化退火溫度。

2、DNA模板量太少。增加DNA模板量。

3、PCR循環(huán)數(shù)不足。增加反應(yīng)循環(huán)數(shù)。

4、引物量不足。增加體系中引物含量。

5、延伸時(shí)間太短。以1 kb/min的原則設(shè)置延伸時(shí)間。

6、變性時(shí)間過長。變性時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致DNA聚合酶失活。DNA模板中存在抑制劑。確保DNA模板干凈。



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