欧美精品一区二区三区四区,亚洲国产成人精品无码区在线秒播,日韩精品中文字幕无码专区,91麻豆精品一二三区在线

細(xì)胞復(fù)蘇過程

日期:2024-10-19 04:28
瀏覽次數(shù):88
摘要: 細(xì)胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細(xì)胞解凍,再培養(yǎng)傳代。細(xì)胞復(fù)蘇應(yīng)采用快速融化的方法,這樣的目的是為了讓細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化,從而避免慢悠悠的融化,使得水分滲入細(xì)胞內(nèi)再結(jié)晶,從而對細(xì)胞再次造成傷害,從而影響細(xì)胞的存活率。 細(xì)胞復(fù)蘇: 1:細(xì)胞是凍在-80℃的環(huán)境里面的,所以拿出來后,應(yīng)該盡快去37℃水浴鍋里解凍(我一般是放在PE手套里面,然后在37攝氏度的水域上快速融化。)這一步的操作不要超過一分鐘! 2:用預(yù)熱的培養(yǎng)基稀釋凍存的細(xì)胞(這步我會把融化的凍存...

       細(xì)胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細(xì)胞解凍,再培養(yǎng)傳代。細(xì)胞復(fù)蘇應(yīng)采用快速融化的方法,這樣的目的是為了讓細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)融化,從而避免慢悠悠的融化,使得水分滲入細(xì)胞內(nèi)再結(jié)晶,從而對細(xì)胞再次造成傷害,從而影響細(xì)胞的存活率。

細(xì)胞復(fù)蘇:

1:細(xì)胞是凍在-80℃的環(huán)境里面的,所以拿出來后,應(yīng)該盡快去37℃水浴鍋里解凍(我一般是放在PE手套里面,然后在37攝氏度的水域上快速融化。)這一步的操作不要超過一分鐘!

2:用預(yù)熱的培養(yǎng)基稀釋凍存的細(xì)胞(這步我會把融化的凍存液加入到15ml的管子里,加入3ml的預(yù)熱的培養(yǎng)液,在超凈臺里完成)

3:離心200g 5-10min,具體的離心的時間不同的細(xì)胞略有不同得具體得看培養(yǎng)的protocol

4:在離心以后,倒掉上清(因?yàn)閮龃嬉豪镉肈MSO, 它的作用是在凍存細(xì)胞時加入,加入的量大概是總體積的10%,起到防凍劑的作用,防止冷凍過程中細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。)

5:用預(yù)熱的培養(yǎng)液重懸細(xì)胞(根據(jù)培養(yǎng)的細(xì)胞皿的體積調(diào)整,我參照了GM12878,K562的培養(yǎng)protocol,剛開始的細(xì)胞密度不要超過10^6 /ML,但是細(xì)胞的密度也別太稀了,要不然長的會不好)

6:放到37℃,5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)細(xì)胞。

PS:在看細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的時候,有一個詞叫做“慢凍快融”,所以在解凍細(xì)胞的時候,在加入預(yù)熱的培養(yǎng)基洗細(xì)胞之前,操作盡量的快,減少DMSO對細(xì)胞的傷害。我的凍存液的配方是:90%的FBS+10%的DMSO,凍存效果沒問題!

国产成人AV综合久久视色| 日韩不卡手机视频在线观看| 欧美人与c交zzzxxxzz0| 极品老熟女| 99精品热| 日日夜夜综合网| 曰韩av| 丁香久久| 亚洲AV成人无码久久精品中出出| 国产精品成人无码免费| 一个人在线观看WWW免费视频 | 精品免费国偷自产在线视频| 亚洲色图网站| 被领导抱进卧室啪啪h| 色婷婷基地| 午夜精品久久久久久久| 韩国三级bd高清中字在线观看| 一本大道AV伊人久久综合| 精品国产美女福到在线不卡| 国产免费观看黄AV片| WWW亚洲精品久久久无码| 国产精品人人做人人爽人人添 | 国产成人精品久久综合| 九九久久精品无码专区| 片多多免费观看高清影视| 久久夜色撩人精品国产| 欧美成人看片黄A免费看| 强开小婷嫩苞又嫩又紧视频| 中文字幕奈奈美被公侵犯| 好爽毛片一区二区三区四无码三飞| 99伊人| 黄色的视频| 武城县| 年轻漂亮岳每4乱理2| 久久天天躁狠狠躁夜夜躁2014| 黑人巨大精品欧美一区二区 | 白浆是什么| 乐进| 九色少妇丨porny丨自拍| 国产精品麻豆99久久久久久 | 亚洲少妇精品|