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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):50T轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):BH-P64120
  • 產(chǎn)品**:博湖
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
50T轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因PCR檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
詳情介紹:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

50T轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因PCR檢測(cè)試劑盒

50T

BH-P64120

它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。


實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
固醇攜帶蛋白2抗體英文名稱(chēng):SCP2 0.2ml

  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5抗體英文名稱(chēng):SOCS5 0.1ml

  碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體英文名稱(chēng):SLC4A4 0.1ml

  SHISA蛋白家族9抗體英文名稱(chēng):SHISA9 0.2ml

  細(xì)胞凋亡抑制因子抗體英文名稱(chēng):Survivin 0.2ml

  外紡錘體極樣蛋白1抗體英文名稱(chēng):Separase 0.1ml

  磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體英文名稱(chēng):phospho-STAT5a(Tyr694) 0.1ml

  抗冠狀病毒表面S蛋白抗體英文名稱(chēng):SARS S-protein 0.1ml

  突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1英文名稱(chēng):SYAP1 0.1ml

  素抗體英文名稱(chēng):Secretin 0.1ml

  可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體英文名稱(chēng):Slc22A17 0.1ml

  磷酸化Src原癌基因抗體英文名稱(chēng):phospho-Src(Tyr529) 0.1ml

  SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體英文名稱(chēng):SHIP1 0.2ml

  磷酸化糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶1抗體英文名稱(chēng):Phospho-SGK1 (Thr256) 0.1ml

  C-SKI抗體英文名稱(chēng):SKI 0.1ml

50T轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因PCR檢測(cè)試劑盒氯化鈉結(jié)晶紫增液 Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth 250g

氯化鈉蔗糖瓊脂 Sodium Chloride Sucrose Agar 250g

嗜鹽選擇性瓊脂 Halophilic Bacteria Selective Agar 250g

氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ) Sodium Chloride Blood Agar Base 250g

霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA) KIA 250g

T1N1瓊脂 T1N1 Agar 250g

T1N0肉湯 TIN0 Broth 250g

T1N3肉湯 T1N3 Broth 250g

精氨酸葡萄糖斜面瓊脂(AGS) Arginine Dextrose Agar 100

mCPC培養(yǎng)基 mCPC Medium 250g

mCPC培養(yǎng)基添加劑 mCPC Medium Supplement 1ml*5

副溶血性弧瓊脂 Vibrio parahaemolyticus agar 250g

副溶血性弧增液 Vibrio parahaemolyticus Broth 250g

注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

 


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