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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化

  • 產(chǎn)品型號(hào):P-X1143
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化公司正在出售的產(chǎn)品:P388D1小鼠樣瘤細(xì)胞懸浮細(xì)胞母細(xì)胞樣P388D1:P388D1小鼠細(xì)胞系組織來(lái)源:瘤貓表皮生長(zhǎng)因子(EGF)elisa分析檢測(cè)試劑盒EGF ELISA Kit
詳情介紹:

PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化


英文簡(jiǎn)稱

規(guī)格

貨號(hào)

PC12:PC12

1×106

P-X1143

產(chǎn)品詳情:


細(xì)胞別稱:PC12未分化;大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化

種屬來(lái)源:大鼠

年齡性別:雄性

組織來(lái)源:腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤

生長(zhǎng)特性:貼壁/懸浮

細(xì)胞形態(tài):成團(tuán)狀懸浮、半貼壁;小的形狀不規(guī)則細(xì)胞

背景簡(jiǎn)介:PC-12(未分化)細(xì)胞是來(lái)自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤。PC-12(未分化)細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)受體,NGF可誘導(dǎo)產(chǎn)生神經(jīng)表型。PC-12(未分化)細(xì)胞不合成腎上腺素。

生物等級(jí):

細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè):無(wú)

基因表達(dá)情況:

保藏機(jī)構(gòu):中國(guó)科學(xué)院分子細(xì)胞科

培養(yǎng)基:1640+5%FBS+10%馬血清+P/S

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件:無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:

1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例:
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理:


實(shí)驗(yàn)步驟:


1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上,利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板,轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞,并置于37 ℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基,并繼續(xù)培養(yǎng);
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng),直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%,獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。

公司正在出售的產(chǎn)品:

FGD1蛋白抗體 FGD1

原鈣粘附蛋白β1抗體

FITC標(biāo)記小鼠CD80單克隆抗體 mouse CD80/FITC

腫瘤壞死因子β抗體(TNFβ)  Anti-TNF beta

磷脂酰肌醇激酶單克隆抗體 PIK3R1

HIPK4

擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白重組兔單克隆抗體 ATM

源相互作用蛋白激酶4抗體

多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1  Anti-PARP1

PCDHB1

環(huán)指蛋白3抗體  Anti-PCGF3/RNF3

Rabbit Anti-Bovine IgM / FITC

多配體聚糖結(jié)合蛋白1抗體  Anti-Syntenin 1

磷酸化內(nèi)收蛋白抗體

FITC標(biāo)記的兔抗牛IgM

phospho-alpha Adducin (Thr445)

大鼠CD30分子(CD30)elisa分析檢測(cè)試劑盒

鋅結(jié)合乙醇脫氫酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體  Anti-ZADH2

CD30 ELISA Kit

NCK銜接蛋白2抗體  Anti-NCK2/Nck beta

人高爾基蛋白73(GP-73)elisa分析檢測(cè)試劑盒

Rad51抗體  Anti-Rad51

HumanGP-73ELISAKit

信號(hào)識(shí)別顆??贵w  Anti-Signal recognition particle

大鼠雌酮(E1)elisa檢測(cè)試劑盒

D二聚體(D2D)elisa檢測(cè)試劑盒

小鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化細(xì)胞PI3K激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C

內(nèi)核膜蛋白MAN1抗體

MAN1

Defensin alpha 5


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